
過濾器Mahle濾芯(xin)PI 2145 PS 3三(san)五及(ji)緣分
過濾器Mahle濾芯(xin)PI 2145 PS 3三(san)五及(ji)緣分
過濾器Mahle濾芯(xin)PI 2145 PS 3三(san)五及(ji)緣分
惠言達(da)寄(ji)語(yu):
生(sheng)活是(shi)否永遠艱辛(xin)?總(zong)是(shi)如(ru)此。成人(ren)的世(shi)界裏(li),本沒有容易二字(zi)。
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代理(li)品牌(pai):
德國(guo)Honsberg(豪(hao)斯(si)派克(ke))流量(liang)計(ji)、流量(liang)開(kai)關 (廣(guang)泛(fan)用(yong)於(yu)電廠(chang)、潤(run)滑(hua)站)
德國(guo)Knick(科尼(ni)可)PH分析儀(yi),容氧(yang)分析儀(yi),水(shui)質(zhi)分析儀(yi)(常(chang)用於(yu)化工、電廠(chang)領(ling)域)
德國(guo)Knick(科尼(ni)可)隔離放(fang)大(da)器、信號(hao)隔(ge)離器、安(an)全(quan)柵 (地(di)鐵(tie)及(ji)鋼廠電(dian)控(kong)櫃(gui))
德(de)國(guo)Proxitron(柏西(xi)鐵(tie)龍(long))高溫(wen)接近開(kai)關,熱(re)金屬檢測,紅外(wai)測溫(wen)儀(yi)(鋼廠)
德(de)國Ahlborn(愛(ai)爾(er)邦(bang))數(shu)據(ju)采(cai)集器
德國(guo)Mankenberg 減(jian)壓閥(fa),排氣(qi)閥,氮封閥(fa) (廣泛用於(yu)化工、電廠(chang)及(ji)飲(yin)料行(xing)業)
德國Beck(貝克(ke))壓力(li)開關、微(wei)差(cha)壓(ya)開關(guan) (樓宇控(kong)制(zhi)系統(tong))
德國Hoentzsch氣(qi)體(ti)流(liu)量(liang)計(ji)
奧地(di)利Kral 螺(luo)桿泵(beng)(大(da)型液壓站(zhan))
以(yi)下(xia)是(shi)我公司優(you)勢(shi)品牌(pai),歡迎新老客戶(hu)前(qian)來咨(zi)詢:
Hydac (賀德克(ke)) 【壓力(li)傳感器,溫度(du)傳感器,濾芯(xin) 】
Turck(圖(tu)爾(er)克(ke)) 【接近(jin)開(kai)關,總(zong)線(xian)模塊,壓(ya)力(li)變送(song)器等(deng)】
Balluff(巴(ba)魯(lu)夫(fu))【接(jie)近開關,位(wei)移(yi)傳感器,光(guang)電(dian)傳感器】
Heidenhain(海德(de)漢)【編(bian)碼(ma)器,光(guang)柵(zha)尺(chi)及(ji)其配(pei)件(jian)】
Burster(布(bu)瑞(rui)斯特(te)) 【傳感器,歐(ou)姆表,工件(jian)夾具】
Mahle(瑪勒)【濾芯(xin),過(guo)濾器,密封套件(jian)】
Suco(蘇克(ke))【壓力(li)開關,變(bian)送(song)器】 Lenord+Bauer(蘭寶)【編(bian)碼(ma)器】
Fibro【工件(jian)夾具,旋轉(zhuan)裝置(zhi)】 Bucher(布赫(he))【閥門,齒輪泵(beng)】
Brinkmann(布(bu)曼(man))【泵(beng),電(dian)機】 KRAL(克(ke)拉)【流量(liang)計(ji),螺桿(gan)泵(beng)】
Beckhoff(倍(bei)福(fu))【總(zong)線(xian)模塊】 Knoll(科(ke)諾(nuo))【泵(beng)、滾筒】
Siemens6DD(西(xi)門(men)子(zi)6DD)【模塊】 Moog(穆(mu)格)【伺(si)服(fu)閥,泵(beng)】
Bender(本德(de)爾(er))【絕(jue)緣檢測儀(yi)】 Kuebler(庫(ku)伯勒(le))【編(bian)碼(ma)器】
JAHNS(雅恩(en)斯(si))【分流馬(ma)達(da)】 Sommer(索瑪(ma)) 【平(ping)行抓(zhua)手(shou),氣缸(gang)】
Woerner 【油流分配(pei)器,流量(liang)計(ji)】 Hawe 【單(dan)向(xiang)閥(fa),泵(beng)】
VEM 【電(dian)機】 EA 【閥門】 PMA【溫(wen)控(kong)器】
DOPAG 計量(liang)泵(beng)】 Murr 【模塊,接(jie)頭】 DOLD【繼(ji)電器】
KSB 【泵(beng),電(dian)機】 B&R 【控(kong)制(zhi)模塊,絕(jue)緣測試(shi)儀(yi)】
Parker(派克(ke))閥門(men),【柱(zhu)塞泵(beng),放(fang)大(da)器,油缸(gang)】
77536550 | mahle | Nachruestsatz/Expansion kit EL.Oberteil/Upper part S/O | |
78308017 | mahle | Nachruestsatz/Expansion kit EL.Oberteil/Upper part Wechsler/Change-over contact | |
79764036 | mahle | Nachruestsatz/Expansion kit EL.Oberteil/Upper part Wechsler/Change-over contact M12x1 | |
77970445 | mahle | Nachruestsatz/Expansion kit EL.Oberteil/Upper part W 2SP LED | |
76118590 | mahle | Nachruestsatz/Expansion kit EL.Oberteil/Upper part W 2SP LED SU | |
77765357 | mahle | PIS 3003 EL.Oberteil/Upper part O/SU | |
76390264 | mahle | EL.Oberteil/Upper part S 2SP VERP/packed. | |
78308025 | mahle | Leitungsdose/Cable socket + 2 LED 10-30V | |
78307548 | mahle | Leitungsdose/Cable socket + LED 10-220 V | |
78285330 | mahle | Schutzkappe/Protection cap Z PIS 3084/87/93/98 VERP/packed. | |
77870587 | mahle | DSO 1,2 G1/4 ST | |
77870595 | mahle | DSO 2,2 G1/4 ST | |
77870603 | mahle | DSO 5,0 G1/4 ST | |
77863814 | mahle | DSS 1,2 G1/4 ST | |
77845845 | mahle | DSS 2,2 G1/4 ST | |
77863822 | mahle | DSS 5,0 G1/4 ST | |
78308900 | mahle | 傑QQ3307575929 | HEO 2200 BP M. Schutzkappe/Protection cap |
78308892 | mahle | HES 2200 BP M. Schutzkappe/Protection cap | |
78308926 | mahle | LEO 250 I M. Schutzkappe/Protection cap | |
78308918 | mahle | LES 250 I M. Schutzkappe/Protection cap | |
77669690 | mahle | PIS 3070/-50 MBAR | |
77669724 | mahle | PIS 3070/-200 MBAR | |
78309056 | mahle | TB 745 E150 Unterdruckanz./ Vacuum indicator | |
78309064 | mahle | TB 745/1 E150 Unterdruckanz./ Vacuum indicator | |
78309049 | mahle | TB 746/1 E150 Unterdruckanz./ Vacuum indicator | |
79603101 | mahle | LES_7250ID-00 Unterdruckanz. / Vacuum indicator | |
79358326 | mahle | Manometer/gauge G1/4-NG40 (0 bis 4bar)rot/grue | |
70521417 | mahle | Manometer/gauge R1/4-NG50 (0 BIS 6 BAR) | |
77870611 | mahle | 傑QQ3307575929 | Manometer/gauge R1/4-NG50 (0 BIS 10 BAR) |
77617558 | mahle | Manometer/gauge R1/4-NG50 (-1 BIS 0 BAR) | |
76345763 | mahle | Manometer/gauge R1/8-NG40 (-1 BIS+0,6 BAR) | |
77687643 | mahle | 852 507 MIC 3-er Gebinde/3 pcs package | |
77643547 | mahle | 852 507 SM-L 3-er Gebinde/3 pcs package | |
77687692 | mahle | 852 514 MIC 3-er Gebinde/3 pcs package | |
77643562 | mahle | 852 514 SM-L 3-er Gebinde/3 pcs package | |
77687726 | mahle | 852 516 MIC 2-er Gebinde/2 pcs package | |
77789381 | mahle | 852 516 MOL 2-er Gebinde/2 pcs package | |
77687759 | mahle | 852 516 SM-L 2-er Gebinde/2 pcs package | |
77687767 | mahle | 852 519 MIC 3-er Gebinde/3 pcs package | |
77643554 | mahle | 852 519 SM-L 3-er Gebinde/3 pcs package | |
77687999 | mahle | 852 621 MIC 3-er Gebinde/3 pcs package | |
77789365 | mahle | 852 621 MOL 3-er Gebinde/3 pcs package | |
77645625 | mahle | 852 621 SM-L 3-er Gebinde/3 pcs package | |
77688021 | mahle | 852 622 MIC 2-er Gebinde/2 pcs package | |
77643570 | mahle | 傑QQ3307575929 | 852 622 SM-L 2-er Gebinde/2 pcs package |
77789472 | mahle | 852 779 Einfuellsieb/Filler strainer 200 (f.Pi 0125) | |
77950298 | mahle | 852 822 MIC | |
77873318 | mahle | 852 822 MOL | |
77950348 | mahle | 852 822 SM-L | |
78206831 | mahle | 852 937 MIC 3-er Gebinde/3 pcs package | |
76101174 | mahle | 852 985 MIC/2-er Gebinde/2 pcs package | |
76101182 | mahle | 852 985 SM-L/2-er Gebinde/2 pcs package | |
77728199 | mahle | Einfuellsieb/Filler strainer PI 0125-0146 | |
79343013 | mahle | 傑(jie)QQ3307575929 | Nachruestdeckel/Retrofit cover Pi 012.. /UM |
79704776 | mahle | Schwappschutz/Spillage protection Z PI 0126 0,15 BAR V2A VP | |
79343377 | mahle | Schwappschutz/Spillage protection Z PI 0126 0,15 BAR VZK VP | |
77681133 | mahle | 852 024 DRG 25 NBR | |
77681158 | mahle | 852 024 DRG 60 NBR | |
77681166 | mahle | 852 024 DRG 100 NBR | |
77681182 | mahle | 852 024 MIC 10 NBR | |
77681208 | mahle | 852 024 MIC 25 NBR | |
77681232 | mahle | 852 034 DRG 10 NBR | |
77681240 | mahle | 852 034 DRG 25 NBR | |
77681265 | mahle | 852 034 DRG 60 NBR | |
77681380 | mahle | 852 034 DRG 100 NBR | |
77681281 | mahle | 傑(jie)QQ3307575929 | 852 034 DRG VST 10 NBR |
77681299 | mahle | 852 034 DRG VST 25 NBR | |
77681323 | mahle | 852 034 DRG VST 60 NBR | |
77681356 | mahle | 852 034 DRG VST 100 NBR | |
77568512 | mahle | 852 034 MIC 10 NBR | |
77681406 | mahle | 852 034 MIC 25 NBR | |
77681422 | mahle | 852 034 MIC VST 10 NBR | |
77681430 | mahle | 852 034 MIC VST 25 NBR | |
77681471 | mahle | 852 034 SMX 3 NBR | |
77681489 | mahle | 852 034 SMX 10 NBR | |
77681497 | mahle | 852 034 SMX 25 NBR | |
77681513 | mahle | 852 034 SMX VST 3 NBR | |
77681521 | mahle | 852 034 SMX VST 10 NBR | |
77681539 | mahle | 852 034 SMX VST 25 NBR | |
77681562 | mahle | 852 047 MIC 5 NBR | |
77681570 | mahle | 852 047 MIC 10 NBR | |
77681596 | mahle | 852 047 MIC 25 NBR | |
77681604 | mahle | 852 059 DRG 10 NBR | |
77681612 | mahle |
| 852 059 DRG 25 NBR |
77681638 | mahle |
| 852 059 DRG 60 NBR |
77681653 | mahle |
| 852 059 DRG 100 NBR |
77681679 | mahle |
| 852 059 MIC 10 NBR |
77681687 | mahle |
| 852 059 MIC 25 NBR |
77681703 | mahle |
| 852 059 SMX 10 NBR |
77681729 | mahle |
| 852 059 SMX 25 NBR |
77681737 | mahle |
| 852 070 DRG 10 NBR |
77681745 | mahle |
| 852 070 DRG 25 NBR |
77681778 | mahle |
| 852 070 DRG 60 NBR |
77681802 | mahle |
| 852 070 DRG 100 NBR |
77681851 | mahle |
| 852 070 MIC 10 NBR |
77681885 | mahle |
| 852 070 MIC 25 NBR |
77681943 | mahle |
| 852 070 SMX 3 NBR |
77681968 | mahle |
| 852 070 SMX 10 NBR |
77681984 | mahle | 852 070 SMX 25 NBR | |
77741713 | mahle | 852 074 DRG 10 | |
77682008 | mahle | 852 074 DRG 25 | |
77682016 | mahle | 852 074 DRG 60 | |
77682024 | mahle | 852 074 DRG 100 | |
77682032 | mahle | 852 074 MIC 10 | |
77682040 | mahle | 852 074 MIC 25 | |
77682081 | mahle | 852 078 MIC 10 NBR |
資(zi)源與能(neng)源問(wen)題(ti)是(shi)目(mu)前面臨(lin)的(de)普(pu)遍問(wen)題(ti)。木質(zhi)纖維(wei)原(yuan)料(liao)因(yin)其可再生(sheng)性(xing)和綠色環保的優(you)點越(yue)來(lai)越(yue)引(yin)起人(ren)們的重(zhong)視,並由(you)此(ci)從石油精煉(Refinery)引(yin)出了生物質(zhi)精煉(Biorefinery)的概(gai)念(nian)。利用(yong)自然(ran)界(jie)豐(feng)富(fu)廉價(jia)的(de)木質(zhi)纖維(wei)素(su)資(zi)源獲取(qu)生物燃料和化學(xue)品已(yi)經(jing)成(cheng)為(wei)研究(jiu)熱(re)點(dian)。糖(tang)類(lei)物質(zhi)是(shi)木質(zhi)纖維(wei)素(su)中碳水(shui)化合物的(de)主(zhu)要組(zu)成(cheng)部分,是(shi)植物光(guang)合作(zuo)用中(zhong)碳同(tong)化作(zuo)用的(de)主(zhu)要形(xing)式(shi),占植物幹(gan)重(zhong)的85%~90%[1],是(shi)地(di)球(qiu)上為豐富(fu)、復雜(za)的(de)有機大(da)分子。生(sheng)物質(zhi)精煉充分開發(fa)糖(tang)平(ping)臺(tai)化合物是(shi)可再生(sheng)資(zi)源開發(fa)的大(da)方向(xiang)。然(ran)而要開(kai)展(zhan)這些(xie)重(zhong)大(da)科研項(xiang)目(mu)並加(jia)深(shen)理(li)論機理(li)研究(jiu),都(dou)要以(yi)糖(tang)類(lei)物質(zhi)的基(ji)礎分析作(zuo)為切入(ru)點(dian)。在木質(zhi)纖維(wei)生(sheng)物質(zhi)精煉利用(yong)的過程中,由於(yu)傳統(tong)木質(zhi)纖維(wei)利用(yong)的造紙(zhi)工業存(cun)在將半纖維(wei)素(su)等(deng)以(yi)黑(hei)液的形(xing)式(shi)燃燒(shao)獲(huo)取(qu)熱(re)能(neng)的不(bu)合理(li)利用(yong)方式(shi)[2],造紙(zhi)產業升級(ji)為(wei)綜合林基(ji)生物質(zhi)精煉工廠過(guo)程中,糖(tang)類(lei)物質(zhi)的新利用(yong)方向為半纖維(wei)素(su)的有效利用(yong)。在木質(zhi)生物質(zhi)中半纖維(wei)素(su)是(shi)僅(jin)次於(yu)纖維(wei)素(su)的主(zhu)要糖(tang)類(lei)成分,它是(shi)由幾(ji)種不同類(lei)型的(de)單(dan)糖(tang)構成(cheng)的異(yi)質(zhi)多(duo)聚(ju)體,包(bao)括木糖(tang)、阿拉伯糖(tang)、甘露(lu)糖(tang)和半乳糖(tang)等(deng)。因(yin)而半纖維(wei)素(su)的有效利用(yong)要求(qiu)進(jin)壹步(bu)確(que)定不(bu)同(tong)工藝下(xia)半纖維(wei)素(su)水解(jie)糖(tang)液中各(ge)種(zhong)糖(tang)和糖(tang)醛(quan)酸,從而在理(li)論上(shang)指(zhi)導(dao)科研與(yu)產品生(sheng)產。在(zai)生物質(zhi)精煉過程中篩選並構(gou)建(jian)壹(yi)套規範(fan)且有(you)效(xiao)的復雜(za)糖(tang)類(lei)體系分析方(fang)法(fa)是(shi)該(gai)領(ling)域科(ke)研工作(zuo)者共同面臨(lin)的(de)課題(ti),本文(wen)通(tong)過(guo)借(jie)鑒(jian)相關(guan)領域的(de)新現(xian)代儀(yi)器分析方(fang)法(fa),對(dui)這壹(yi)課題(ti)進行了淺(qian)析,以(yi)期(qi)能(neng)為讀(du)者提供(gong)綜合參考(kao)。
1木質(zhi)生物質(zhi)及(ji)水(shui)解(jie)液糖(tang)類(lei)組分
按照聚(ju)合度(du)來(lai)分,糖(tang)類(lei)物質(zhi)可分為:單(dan)糖(tang)、寡聚(ju)糖(tang)和多(duo)聚(ju)糖(tang)。按照糖(tang)所含(han)的功(gong)能(neng)基(ji)團來分,可分為醛(quan)、酮、醇和它們的氧(yang)化還(hai)原衍(yan)生物,以(yi)及(ji)由(you)糖(tang)苷(gan)鍵(jian)連接此(ci)類(lei)化合物的(de)聚(ju)體。在(zai)植物中(zhong)糖(tang)類(lei)物質(zhi)主(zhu)要是(shi)纖維(wei)素(su)和半纖維(wei)素(su)。纖維(wei)素(su)糖(tang)類(lei)組分較(jiao)為單(dan)壹(yi),本論文(wen)要點(dian)主(zhu)要針(zhen)對(dui)生物質(zhi)精煉過程中的組分更為(wei)復雜(za)的(de)半纖維(wei)素(su)。研究(jiu)表明,半纖維(wei)素(su)是(shi)由多(duo)種糖(tang)單(dan)元(yuan)組成(cheng)的(de),常見的有(you)木(mu)糖(tang)基(ji)、葡(pu)萄糖(tang)基(ji)、甘露糖(tang)基(ji)、半乳糖(tang)基(ji)、阿拉伯糖(tang)基(ji)、鼠李(li)糖(tang)基(ji)等(deng);並且(qie)半纖維(wei)素(su)分子中(zhong)還(hai)含有(you)糖(tang)醛(quan)酸基(ji)(如(ru)半乳糖(tang)醛(quan)酸基(ji)、葡(pu)萄糖(tang)醛(quan)酸基(ji)等(deng))和乙(yi)酰(xian)基(ji);分子中(zhong)還(hai)常有(you)數(shu)量(liang)不(bu)等(deng)的(de)支(zhi)鏈。由此可見,半纖維(wei)素(su)是(shi)由多(duo)種糖(tang)基(ji)、糖(tang)醛(quan)酸基(ji)所組成(cheng)的(de),並且(qie)分子中(zhong)往往帶有(you)支(zhi)鏈的復合聚(ju)糖(tang)的總(zong)稱(cheng)[3]。壹般(ban)針葉(ye)木(mu)中半纖維(wei)素(su)含量(liang)為(wei)15%~20%,以聚(ju)葡(pu)萄糖(tang)甘露(lu)糖(tang)為主(zhu),同時(shi)還有(you)少(shao)量(liang)聚(ju)木糖(tang);而闊葉(ye)木(mu)中的半纖維(wei)素(su)壹般(ban)占木(mu)材(cai)的(de)20%~25%,也有(you)的高達(da)35%,主(zhu)要是(shi)聚(ju)木糖(tang)類(lei),同時(shi)還伴隨有少量(liang)的(de)聚(ju)葡(pu)萄糖(tang)甘露(lu)糖(tang)和聚(ju)鼠李(li)糖(tang)半乳糖(tang)醛(quan)酸木(mu)糖(tang),其中聚(ju)木糖(tang)類(lei)主(zhu)要是(shi)聚(ju)O-乙(yi)酰(xian)基(ji)-(4-O-甲基(ji)葡(pu)萄糖(tang)醛(quan)酸)木(mu)糖(tang)。不同(tong)原料(liao)的半纖維(wei)素(su)含量(liang)及(ji)組(zu)成不(bu)同。同時(shi)不同(tong)的(de)生物質(zhi)精煉過程中分離半纖維(wei)素(su)的水解(jie)液組分也有(you)很(hen)大(da)差異(yi),並且(qie)由(you)於(yu)水解(jie)程度(du)的(de)不(bu)同而形成(cheng)了復雜(za)體(ti)系。但就(jiu)單(dan)糖(tang)分析而言主(zhu)要針(zhen)對(dui)葡(pu)萄糖(tang)、木糖(tang)、阿拉伯糖(tang)、甘露(lu)糖(tang)、半乳糖(tang)的定(ding)量(liang)檢測。
2生(sheng)物質(zhi)精煉過程糖(tang)類(lei)傳統(tong)分析方(fang)法(fa)
復雜(za)體(ti)系糖(tang)類(lei)分析在(zai)生(sheng)物質(zhi)精煉過程中具有重(zhong)要意(yi)義(yi)。在(zai)生(sheng)物質(zhi)精煉的半纖維(wei)素(su)利用(yong)過程中,由於(yu)半纖維(wei)素(su)本身(shen)糖(tang)基(ji)和糖(tang)醛(quan)酸基(ji)種類(lei)的多(duo)樣化,使(shi)得對(dui)於(yu)半纖維(wei)素(su)利用(yong)技術的機理(li)研究(jiu)在(zai)很(hen)大(da)程度(du)上(shang)依(yi)賴於(yu)多(duo)種低聚(ju)糖(tang)、寡糖(tang)及(ji)單(dan)糖(tang)的定(ding)性和定量(liang)分析。傳統(tong)方法(fa)由於(yu)不能(neng)對(dui)復雜(za)體(ti)系的糖(tang)類(lei)物質(zhi)進行(xing)分離而難以(yi)準確(que)分析。傳統(tong)的菲林(lin)法(fa)、DNS等(deng)化學(xue)分析方(fang)法(fa)只是(shi)對(dui)還原(yuan)糖(tang)等(deng)給(gei)出定(ding)量(liang)分析。在(zai)制(zhi)漿造紙(zhi)檢測分析中(zhong),傳統(tong)化學(xue)分析的(de)聚(ju)戊糖(tang)含量(liang)也是(shi)通(tong)過(guo)鹽酸(suan)水(shui)解(jie)成戊糖(tang)並進(jin)壹(yi)步(bu)脫(tuo)水形成(cheng)糠(kang)醛(quan),通(tong)過(guo)糠(kang)醛(quan)含量(liang)的(de)測定(ding)來(lai)間接(jie)表達(da)半纖維(wei)素(su)中的五碳糖(tang)高聚(ju)物[4]。但(dan)這些(xie)方法(fa)對(dui)於(yu)生物質(zhi)精煉半纖維(wei)素(su)水解(jie)的機理(li)研究(jiu)和產品開(kai)發(fa)不(bu)能(neng)提供(gong)更實(shi)質(zhi)性的(de)幫助。早期(qi)采(cai)用的(de)酶分析法(fa)、紙(zhi)色(se)譜(pu)法(fa)、薄層(ceng)色(se)譜(pu)法(fa)及(ji)柱(zhu)層(ceng)析法(fa)等(deng)經(jing)典方法(fa)可以進(jin)行(xing)混合糖(tang)的分析,但(dan)分辨率(lv)低、時間長(chang)、定(ding)量(liang)測定(ding)困(kun)難(nan),使(shi)得這些(xie)具有(you)初(chu)步(bu)分離效果的傳統(tong)方法(fa)也受(shou)到(dao)了限制(zhi)。隨(sui)著(zhe)現(xian)代儀(yi)器分析技(ji)術(shu)的發展(zhan),混(hun)合體系的糖(tang)類(lei)分析也隨(sui)之產生(sheng)了新的(de)分析方(fang)法(fa)。
3混合糖(tang)類(lei)組成(cheng)分析方(fang)法(fa)
3.1離子色譜(pu)法(fa)(IC)應用(yong)離子色譜(pu)法(fa)是(shi)將改(gai)進(jin)後(hou)的(de)電導(dao)檢測器安(an)裝在(zai)離子交(jiao)換(huan)樹(shu)脂柱(zhu)後(hou),以(yi)連續檢測色(se)譜(pu)分離的離子的方法(fa)。1975年(nian)H.斯莫(mo)爾(er)等(deng)人(ren)將經(jing)典的離子交(jiao)換(huan)色譜(pu)與高效(xiao)液相色(se)譜(pu)技術(shu)相結(jie)合,創造(zao)了使(shi)用連續電導(dao)檢測器的現(xian)代離子色譜(pu)法(fa),現(xian)代離子色譜(pu)使(shi)用小粒度(du)和低交(jiao)換(huan)容量(liang)的(de)樹(shu)脂及(ji)小柱(zhu)徑(jing)的分離柱以及(ji)進(jin)樣閥進(jin)樣,泵(beng)輸(shu)送(song)洗(xi)脫(tuo)液,具有(you)迅(xun)速(su)、連續、高效(xiao)、靈敏(min)、可同時(shi)測定(ding)多(duo)組分、不需(xu)要預(yu)先(xian)衍生(sheng)化等(deng)優(you)點(dian),可用於(yu)分析幾(ji)乎所有的(de)單(dan)糖(tang)、大(da)部分的寡(gua)糖(tang)及(ji)低聚(ju)糖(tang)。彭雲(yun)雲(yun)等(deng)[5]采(cai)用離子色譜(pu)法(fa)分析甘(gan)蔗渣(zha)半纖維(wei)素(su)中各(ge)種(zhong)糖(tang)基(ji)及(ji)糖(tang)醛(quan)酸,水(shui)解(jie)液經(jing)中(zhong)和、過濾、稀釋(shi)即可測定(ding),采(cai)用色(se)譜(pu)條件(jian):色(se)譜(pu)柱:淋(lin)洗液:0.001molNaOH-0.05molNaAC;CarboPaePAl(2×250mm),保護(hu)柱:CarboPacPAl(2×50mm);柱(zhu)溫:30℃;體積流量(liang):0.650ml/min;進(jin)樣體積:10μL;檢測器:脈沖安(an)培(pei)檢測器,金電極(ji)。結(jie)果(guo)表明氫(qing)氧(yang)化鈉(na)和醋酸鈉淋洗液梯(ti)度(du)洗(xi)脫(tuo)可以分析糖(tang)醛(quan)酸及(ji)單(dan)糖(tang)組成(cheng),靈敏(min)度(du)高、重(zhong)現(xian)性好(hao)、結果(guo)準確(que)。
3.2高效(xiao)液相色(se)譜(pu)法(fa)(HPLC)應用(yong)高效(xiao)液相色(se)譜(pu)(HPLC)采(cai)用高壓(ya)液相泵(beng)、高效(xiao)固定相和高靈敏(min)度(du)檢測器,具有(you)分辨率(lv)高、分離速度(du)快(kuai)、分離效果好、不(bu)破(po)壞(huai)樣品、重(zhong)現(xian)性好(hao)的優(you)點。單(dan)糖(tang)檢測器有紅外(wai)檢測器、示差(cha)折(zhe)光(guang)檢測器、光(guang)散(san)射檢測器、電化學(xue)檢測器和紫(zi)外(wai)檢測器。由於(yu)糖(tang)類(lei)本身(shen)沒有紫(zi)外(wai)吸(xi)收,若不進行衍(yan)生化只(zhi)能(neng)采(cai)用蒸(zheng)發光(guang)散(san)射檢測器(ELSD)或(huo)示(shi)差折(zhe)光(guang)檢測器(RI)。將糖(tang)類(lei)物通(tong)過(guo)衍(yan)生(sheng)化轉(zhuan)變為具有紫(zi)外(wai)吸(xi)收或(huo)可產生(sheng)熒光(guang)的(de)物質(zhi)可實現(xian)高靈敏(min)度(du)檢測和痕量(liang)分析,但(dan)操(cao)作(zuo)復雜(za)。方(fang)宏等(deng)[6]用(yong)高效(xiao)液相色(se)譜(pu)法(fa)測定(ding)甘(gan)蔗渣(zha)半纖維(wei)素(su)水解(jie)物中(zhong)的(de)單(dan)糖(tang)含量(liang)。以(yi)HypersilNH2柱為(wei)色(se)譜(pu)分析柱(zhu),用(yong)示差折(zhe)光(guang)檢測器檢測,流(liu)動(dong)相是(shi)乙(yi)腈∶水(8∶20)。在(zai)此色(se)譜(pu)條件(jian)下(xia),甘(gan)蔗渣(zha)半纖維(wei)素(su)水解(jie)物分離成:木糖(tang)、阿拉伯糖(tang)、果糖(tang)和葡(pu)萄糖(tang)。各(ge)單(dan)糖(tang)呈良(liang)好的(de)線性(xing)關(guan)系。加樣回(hui)收率的(de)平(ping)均(jun)值(zhi)為97.3%~98.7%,此(ci)方(fang)法(fa)簡(jian)便、快(kuai)速(su)、準確(que),適(shi)合檢測下(xia)限要求(qiu)不(bu)高的(de)生物質(zhi)半纖維(wei)素(su)水解(jie)糖(tang)液。AloiaRomaní等(deng)[7]對(dui)案木(mu)生物質(zhi)精煉過程中自催(cui)化半纖維(wei)素(su)糖(tang)液中葡(pu)萄糖(tang)、阿拉伯糖(tang)、木糖(tang)、糠(kang)醛(quan)、羧(suo)甲基(ji)糠(kang)醛(quan)等(deng)進(jin)行(xing)了高效(xiao)液相色(se)譜(pu)壹次(ci)性分析,而低聚(ju)糖(tang)則采(cai)用4%硫酸水(shui)解(jie)後(hou)二次(ci)測定(ding)單(dan)糖(tang)增加(jia)量(liang)的(de)方法(fa),作(zuo)為實(shi)驗(yan)過程中的常規檢測操(cao)作(zuo)快(kuai)捷、重(zhong)現(xian)性好(hao)。利用(yong)HPLC測糖(tang),要根(gen)據(ju)樣品中(zhong)的(de)糖(tang)的種(zhong)類(lei)、含量(liang)和純度(du)來(lai)選(xuan)擇合適(shi)的檢測器,同時(shi)根(gen)據(ju)實驗(yan)的具(ju)體需(xu)要決(jue)定(ding)是(shi)否需要較(jiao)為復雜(za)的(de)衍生化過(guo)程及(ji)昂貴的(de)糖(tang)柱。
3.3高效(xiao)陰(yin)離子交(jiao)換(huan)-脈沖安(an)培(pei)檢測法(fa)(HPAE-PAD)應用(yong)高效(xiao)陰(yin)離子交(jiao)換(huan)-脈沖安(an)培(pei)檢測法(fa)(HPAE-PAD)是(shi)壹種陰(yin)離子交(jiao)換(huan)色譜(pu)與脈沖安(an)培(pei)檢測器結合的新的(de)液相色(se)譜(pu)法(fa),檢測*可達(da)到(dao)幾(ji)十個(ge)ug/L水(shui)平(ping)。糖(tang)類(lei)化合物是(shi)壹種多(duo)羥(qiang)基(ji)醛(quan)或(huo)酮(tong),可分為單(dan)糖(tang)、低聚(ju)糖(tang)和多(duo)糖(tang),低聚(ju)糖(tang)由2~10個(ge)單(dan)糖(tang)分子失(shi)水(shui)而成,多(duo)糖(tang)是(shi)由10個(ge)以(yi)上單(dan)糖(tang)分子失(shi)水(shui)而得,低聚(ju)糖(tang)和多(duo)糖(tang)水解(jie)後(hou)即得(de)單(dan)糖(tang)。中性(xing)糖(tang)類(lei)為Pka在(zai)12~14之間的弱酸(suan)。在高pH值(zhi)的淋(lin)洗(xi)液中,例如(ru)10~20mmol/LNaOH中,它們會部分或(huo)全(quan)部以(yi)陰(yin)離子形式(shi)存(cun)在,能(neng)在陰(yin)離子交(jiao)換(huan)柱上保留(liu)並得(de)到(dao)分離。梁立(li)娜(na)等(deng)[8]利用(yong)高效(xiao)陰(yin)離子交(jiao)換(huan)-脈沖安(an)培(pei)檢測(HPAE-PAD)同(tong)時(shi)分離測定(ding)8種(zhong)單(dan)糖(tang)和2種糖(tang)醛(quan)酸。以(yi)CarboPacPA20陰(yin)離子交(jiao)換(huan)柱為分離柱,以2mmol/LNaOH溶(rong)液將8種單(dan)糖(tang)從分離柱上洗脫(tuo),而後(hou)用(yong)NaAc(50~200mmol/L)梯(ti)度(du)淋(lin)洗(xi)2種糖(tang)醛(quan)酸,淋(lin)洗液流速(su)0.5ml/min,分析時(shi)間(jian)30min。8種單(dan)糖(tang)和2種糖(tang)醛(quan)酸的(de)檢出限為(wei)2.5~14.4μg/L。5mg/L的(de)10種(zhong)化合物的(de)混(hun)合標準溶(rong)液連續7次進樣,峰面積的相對(dui)標準偏差為0.3%~1.5%。用(yong)所(suo)建立(li)的(de)方法(fa)測定(ding)了多(duo)糖(tang)水解(jie)液和木材半纖維(wei)素(su)水解(jie)液中的(de)單(dan)糖(tang)和糖(tang)醛(quan)酸含(han)量(liang)。劉(liu)婷[9]利用(yong)高效(xiao)陰(yin)離子交(jiao)換(huan)分離-脈沖安(an)培(pei)檢測分析不(bu)同(tong)茶葉多(duo)糖(tang)中的(de)葡(pu)萄糖(tang)、半乳糖(tang)、甘露(lu)糖(tang)和果糖(tang)。陰(yin)離子交(jiao)換(huan)柱:METROSEPCARB(150×4.0mm);淋洗(xi)液:6.0mmol/LNaOH溶(rong)液;柱溫(wen):32℃;淋(lin)洗(xi)液流速(su):1.0ml/min;分析時(shi)間(jian):45min;進樣體積:20μl。優化條件(jian)下(xia)4種(zhong)單(dan)糖(tang)的檢出限為(wei)0.125~2.0mg/L。樣品測定(ding)的(de)回(hui)收率為(wei)91.8%~99.3%。所(suo)建立(li)的(de)方法(fa)分析4種(zhong)常(chang)見茶葉(ye)多(duo)糖(tang)快(kuai)速(su)、有(you)效(xiao)。高效(xiao)陰(yin)離子交(jiao)換(huan)色譜(pu)-脈沖安(an)培(pei)檢測(HPAEC-PAD)的(de)壹(yi)大(da)優點(dian)是(shi)不需要衍(yan)生(sheng)化就(jiu)能(neng)分析單(dan)糖(tang)、大(da)部分的寡(gua)糖(tang)及(ji)低聚(ju)糖(tang),節約時(shi)間和資(zi)金,避(bi)免(mian)了有毒(du)衍生(sheng)試(shi)劑的(de)使(shi)用,對(dui)於(yu)組成(cheng)結(jie)構(gou)大(da)小上(shang)非(fei)常相近(jin)的單(dan)糖(tang)也有(you)很(hen)好的分離效果。
3.4氣相色(se)譜(pu)法(fa)(GC)應用(yong)氣(qi)相色(se)譜(pu)是(shi)多(duo)糖(tang)結構(gou)分析中(zhong)重(zhong)要的(de)手(shou)段之壹,它與質(zhi)譜(pu)聯用可以得(de)出有(you)關(guan)單(dan)糖(tang)殘(can)基(ji)類(lei)型、鍵(jian)的連接方(fang)式(shi)、糖(tang)的序(xu)列和糖(tang)環形(xing)式(shi)、聚(ju)合度(du)等(deng)多(duo)種結(jie)構(gou)信(xin)息。此外(wai),由(you)於(yu)大(da)量(liang)的(de)固定(ding)液和不同的檢測器適(shi)用於(yu)糖(tang)的氣(qi)相色(se)譜(pu)分析,因(yin)而用氣(qi)相色(se)譜(pu)法(fa)測定(ding)糖(tang)類(lei)具有(you)樣品用(yong)量(liang)少(shao)、選擇性好(hao)、分辨率(lv)強、靈敏(min)度(du)高以(yi)及(ji)可用於(yu)定性(xing)及(ji)定(ding)量(liang)分析等(deng)優(you)點(dian)。康(kang)學(xue)軍等(deng)[10]以(yi)三(san)水解(jie)白芷多(duo)糖(tang),水解(jie)產物中(zhong)加(jia)入鹽酸(suan)羥(qiang)胺、吡啶和醋酸酐(gan),衍生(sheng)化反(fan)應生(sheng)成(cheng)糖(tang)腈乙(yi)酸(suan)酯衍生物,采(cai)用氣(qi)相色(se)譜(pu)法(fa)測定(ding)白芷多(duo)糖(tang)的單(dan)糖(tang)組成(cheng)。用OV-101毛(mao)細管(guan)色譜(pu)柱;進(jin)樣溫度(du)為(wei)210℃;檢測器溫度(du)為(wei)240℃;柱(zhu)溫為(wei)程序升溫(wen):初(chu)始(shi)柱溫(wen)110℃,維(wei)持(chi)5min,以(yi)5℃/min的(de)升溫(wen)速(su)率升高到(dao)190℃,維(wei)持(chi)4min,以(yi)3℃/min的(de)升溫(wen)速(su)率升高到(dao)210℃,維(wei)持(chi)20min。白芷多(duo)糖(tang)中含(han)有木(mu)糖(tang)、甘露(lu)糖(tang)、葡(pu)萄糖(tang)、阿拉伯糖(tang)、鼠李(li)糖(tang)和半乳糖(tang)等(deng)7種(zhong)單(dan)糖(tang)成分,並測定(ding)計(ji)算出已(yi)知(zhi)6種(zhong)單(dan)糖(tang):鼠李(li)糖(tang)-阿拉伯糖(tang)-木糖(tang)-甘露(lu)糖(tang)-葡(pu)萄糖(tang)-半乳糖(tang)的摩爾(er)構(gou)成比1.19∶1.19∶0.765∶1∶8.08∶3.34。氣相色(se)譜(pu)法(fa)(GC)分析糖(tang)類(lei),主(zhu)要困(kun)難(nan)在於(yu)糖(tang)類(lei)沒有足夠的揮(hui)發性(xing),須在(zai)色(se)譜(pu)分析之(zhi)前(qian)預先(xian)轉(zhuan)化成(cheng)對(dui)熱(re)較(jiao)穩(wen)定的(de)、易揮(hui)發的(de)衍(yan)生(sheng)物。但(dan)在(zai)衍生(sheng)物的(de)制(zhi)備過(guo)程中,由於(yu)糖(tang)的異(yi)構化會產生(sheng)衍生(sheng)物的(de)異(yi)構體(ti),使(shi)色譜(pu)分析時(shi)每種(zhong)糖(tang)產生(sheng)幾(ji)個(ge)峰,從而影響了組分的分離和定量(liang)。
3.5薄(bo)層(ceng)色(se)譜(pu)法(fa)(TLC)應用(yong)薄(bo)層(ceng)色(se)譜(pu)法(fa)(TLC)是(shi)壹種微量(liang)、快(kuai)速(su)、簡(jian)便、有效的定(ding)性(xing)的(de)半定量(liang)和定量(liang)分析方(fang)法(fa)。薄層(ceng)色(se)譜(pu)的特(te)點是(shi)可以同(tong)時(shi)分離多(duo)個(ge)樣品,分析成(cheng)本低,對(dui)樣品預(yu)處(chu)理(li)要求(qiu)低,對(dui)固定(ding)相、展(zhan)開劑的(de)選擇自由度(du)大(da),適(shi)用於(yu)含有(you)不(bu)易從分離介質(zhi)脫(tuo)附或(huo)含(han)有懸(xuan)浮微(wei)粒或(huo)需(xu)要色(se)譜(pu)後(hou)衍(yan)生化處(chu)理(li)的(de)樣品分析。而新的(de)高效(xiao)薄層(ceng)色(se)譜(pu)(HPTLC)采(cai)用更(geng)細、更均(jun)勻(yun)的(de)改(gai)性(xing)矽膠和纖維(wei)素(su)為固定相,對(dui)吸附(fu)劑進行疏(shu)水(shui)和親(qin)水(shui)改(gai)性(xing),可以實(shi)現(xian)正相和反(fan)相薄(bo)層(ceng)色(se)譜(pu)分離,提高了色譜(pu)的選(xuan)擇性。焦(jiao)廣玲(ling)等(deng)[11]建(jian)立(li)了不同(tong)展開(kai)體(ti)系中薄(bo)層(ceng)色(se)譜(pu)分析單(dan)糖(tang)或(huo)寡(gua)糖(tang)的有(you)效方(fang)法(fa)。以澱(dian)粉寡(gua)糖(tang)、右(you)旋(xuan)糖(tang)酐(gan)寡糖(tang)以及(ji)古羅糖(tang)醛(quan)酸寡(gua)糖(tang)3個(ge)系列寡(gua)糖(tang)和半乳糖(tang)醛(quan)酸、葡(pu)萄糖(tang)醛(quan)酸、半乳糖(tang)、葡(pu)萄糖(tang)、阿拉伯糖(tang)、甘露(lu)糖(tang)、巖(yan)藻糖(tang)、木糖(tang)和鼠李(li)糖(tang)9種單(dan)糖(tang)為研究(jiu)對(dui)象,探(tan)討(tao)其在不(bu)同(tong)展(zhan)開體系下的(de)薄(bo)層(ceng)色(se)譜(pu)行為(wei)。在各(ge)種(zhong)糖(tang)TLC分析中(zhong),若(ruo)供試品中(zhong)主(zhu)要含(han)有(you)酸性(xing)寡(gua)糖(tang),則選(xuan)擇甲酸(suan)展開體(ti)系;若供(gong)試(shi)品含(han)有(you)不(bu)同連接方(fang)式(shi)的中(zhong)性(xing)寡糖(tang),則選(xuan)擇氨水(shui)展開體(ti)系進行(xing)二次(ci)展(zhan)開;若只(zhi)對(dui)單(dan)糖(tang)進行(xing)分離鑒(jian)別,應(ying)采(cai)用三(san)乙(yi)胺展(zhan)開(kai)體系,並采(cai)用苯(ben)胺壹(yi)二苯(ben)胺顯(xian)色(se)劑,根據(ju)Rf值(zhi)和顯(xian)色(se)的不同,區(qu)別(bie)單(dan)糖(tang)的類(lei)型。於(yu)立(li)芹[12]等(deng)測定(ding)紅薯葉中多(duo)糖(tang),經(jing)Sephadex-G100凝(ning)膠(jiao)層(ceng)析法(fa)純化後(hou),利用(yong)薄層(ceng)色(se)譜(pu)法(fa)結合酸水(shui)解(jie),糖(tang)腈乙(yi)酰(xian)化氣(qi)相色(se)譜(pu)分析法(fa)測定(ding)紅薯葉多(duo)糖(tang)的單(dan)糖(tang)組成(cheng)和各(ge)組(zu)成的物質(zhi)的量(liang)比。紅薯葉多(duo)糖(tang)的單(dan)糖(tang)組分有木(mu)糖(tang)、甘露(lu)糖(tang)、葡(pu)萄糖(tang),其量(liang)的(de)比為0.47∶0.35∶0.18。糖(tang)腈乙(yi)酸(suan)酯衍生化方(fang)法(fa)能(neng)較(jiao)好地(di)實(shi)施紅薯葉多(duo)糖(tang)水解(jie)產物的(de)衍(yan)生化。衍(yan)生產物經(jing)幹(gan)燥(zao)沒有發現(xian)色譜(pu)峰明顯(xian)拖(tuo)尾(wei)現(xian)象,適(shi)於(yu)單(dan)糖(tang)衍生(sheng)化產物GC分析前(qian)的(de)處理(li)。
3.6高效(xiao)毛細管(guan)電泳(yong)法(fa)(HPCE)應用(yong)高效(xiao)毛細管(guan)電泳(yong)法(fa)(HPCE)是(shi)近年(nian)來發(fa)展快(kuai)的(de)分析方(fang)法(fa)之壹(yi)。是(shi)以高壓(ya)電場(chang)為驅(qu)動力(li),以毛細管(guan)為分離通(tong)道,依據(ju)樣品中(zhong)各(ge)組(zu)分之間(jian)淌(tang)度(du)和分配(pei)行(xing)為上(shang)的(de)差異實現(xian)分離測定(ding)的(de)液相分離方法(fa)[13]。毛細管(guan)電泳(yong)技(ji)術分離糖(tang)必須解(jie)決電荷問(wen)題(ti),除氨(an)基(ji)糖(tang)、糖(tang)醛(quan)酸及(ji)壹(yi)些(xie)硫酸化糖(tang)外(wai),天(tian)然(ran)糖(tang)分子都(dou)呈電中性,不(bu)能(neng)在電(dian)場(chang)中遷(qian)移。因此糖(tang)的毛(mao)細管(guan)分離分析中(zhong)要采(cai)用解(jie)離、絡合、衍生(sheng)技術(shu)使(shi)糖(tang)帶電(dian)。汲晨鋒(feng)等(deng)[14]采(cai)用水(shui)提醇沈法(fa)從新鮮(xian)蘆筍(sun)中提取(qu)粗(cu)多(duo)糖(tang),采(cai)用高效(xiao)毛細管(guan)電泳(yong)法(fa)測定(ding)單(dan)糖(tang)組成(cheng),可以實(shi)現(xian)蘆筍(sun)粗(cu)多(duo)糖(tang)中的(de)木糖(tang)、果糖(tang)、鼠李(li)糖(tang)、阿拉伯糖(tang)、半乳糖(tang)的分離測定(ding),得(de)到(dao)其百(bai)分比分別為(wei)3.44%、7.92%、10.52%、17.15%、41.85%。研究(jiu)發(fa)現(xian)其緩沖鹽濃度(du)和pH值(zhi)對(dui)單(dan)糖(tang)組分的分離度(du)影(ying)響較(jiao)大(da),文(wen)章(zhang)通(tong)過(guo)比較(jiao)發現(xian)緩沖鹽濃度(du)為(wei)75mmol/L、pH10.5時(shi),分離度(du)好(hao)。通(tong)過(guo)蘆(lu)筍(sun)多(duo)糖(tang)和混合單(dan)糖(tang)的的(de)毛細管(guan)電泳(yong)圖(tu)譜(pu)比較(jiao),可鑒(jian)別出大(da)部分單(dan)糖(tang)。該(gai)技(ji)術分離效果清(qing)晰、定量(liang)準確(que)、時(shi)間短、進(jin)樣量(liang)少(shao),獲得(de)了較(jiao)好的結果(guo)。汪紅等(deng)[15]采(cai)用苯(ben)酚-硫酸比色法(fa)測定(ding)了丹參藥(yao)材(cai)中總(zong)多(duo)糖(tang)的含(han)量(liang),檢測波(bo)長(chang)為490nm,丹參總(zong)多(duo)糖(tang)在0.1122~0.561mg範(fan)圍內(nei)其濃度(du)與(yu)吸(xi)光(guang)度(du)線(xian)性(xing)關系良(liang)好(r=0.9998);以(yi)毛細管(guan)電泳(yong)法(fa)測定(ding)丹參粗(cu)多(duo)糖(tang)組成(cheng),檢測波(bo)長(chang)206nm,結果(guo)顯(xian)示(shi),丹參粗(cu)多(duo)糖(tang)由鼠李(li)糖(tang)∶木糖(tang)∶核糖(tang)∶葡(pu)萄糖(tang)∶甘露(lu)糖(tang)∶阿拉伯糖(tang)∶半乳糖(tang)以2.8∶1.0∶8.5∶12.7∶4.2∶15.3∶58.8的(de)摩爾(er)比組成。
3.7質(zhi)譜(pu)及(ji)質(zhi)譜(pu)聯用技術(shu)由(you)於(yu)組成(cheng)單(dan)糖(tang)種類(lei)與數(shu)目(mu)等(deng)的(de)不(bu)同(tong),糖(tang)的結(jie)構十(shi)分復雜(za),要*闡(chan)明壹(yi)個(ge)糖(tang)的結(jie)構,需(xu)要提供(gong)以下(xia)幾(ji)方面的(de)信息:(1)分子量(liang)及(ji)組(zu)成單(dan)糖(tang)的種(zhong)類(lei)與摩爾(er)比;(2)各(ge)糖(tang)環的(de)構象(呋喃型(xing)或(huo)吡喃型(xing))與異頭碳的(de)構型(xing);(3)各(ge)糖(tang)殘(can)基(ji)間的連接方(fang)式(shi);(4)糖(tang)殘(can)基(ji)的連接順(shun)序;(5)二級(ji)結(jie)構(gou)及(ji)空間(jian)構象(xiang)等(deng)。質(zhi)譜(pu),尤其是(shi)GC-MS(EI或(huo)CI方(fang)式(shi))用於(yu)單(dan)糖(tang)分析已(yi)有(you)幾(ji)十年(nian)的歷(li)史(shi),現(xian)已廣(guang)泛用(yong)於(yu)糖(tang)組成(cheng)分析及(ji)甲(jia)基(ji)化分析以(yi)確(que)定糖(tang)殘(can)基(ji)的連接方(fang)式(shi)。徐(xu)正華(hua)等(deng)[16]建(jian)立(li)了氣相色(se)譜(pu)-質(zhi)譜(pu)(GDMS)法(fa)同時(shi)測定(ding)乳(ru)酸和葡(pu)萄糖(tang)、葡(pu)萄糖(tang)-6-磷酸、果糖(tang)、半乳糖(tang)、乳糖(tang)、1,5-脫(tuo)水山梨(li)醇、山梨(li)醇7種糖(tang)的方(fang)法(fa)。選擇核糖(tang)醇為內(nei)標,進(jin)樣前行(xing)肟化反(fan)應再進(jin)行(xing)矽烷(wan)化反(fan)應。采(cai)用DB-5熔融石(shi)英毛(mao)細管(guan)柱,升溫(wen)程序為初(chu)始(shi)溫度(du)70℃,保持4min,以(yi)8℃/min的速(su)率(lv)升300℃,保持3min。在(zai)優化測定(ding)條件(jian)下(xia)各(ge)對(dui)照品得(de)到(dao)良(liang)好分離,且在測定(ding)範(fan)圍內(nei)具(ju)有良(liang)好線(xian)性關(guan)系(r2>0.983),平(ping)均(jun)加(jia)標(biao)回(hui)收率為(wei)74.5%~104.2%,該(gai)方(fang)法(fa)簡(jian)便、靈敏(min)度(du)高。孫(sun)多(duo)誌(zhi)等(deng)[17]在(zai)稭稈兩(liang)步(bu)稀酸水解(jie)工藝中(zhong),用(yong)氣相色(se)譜(pu)/質(zhi)譜(pu)(GC/MS)法(fa)對(dui)其水解(jie)液中的(de)單(dan)糖(tang)成分進行(xing)測定(ding),采(cai)用2%的(de)氨溶(rong)液將稀酸水解(jie)液中的(de)單(dan)糖(tang)還原(yuan)成糖(tang)醇,然(ran)後(hou)在(zai)甲基(ji)咪唑催(cui)化劑(ji)的作(zuo)用下(xia)和乙(yi)酸(suan)酐(gan)在水(shui)相中(zhong)直接反(fan)應生(sheng)成(cheng)乙(yi)酰(xian)化的(de)糖(tang)醇,用二氯(lv)甲烷(wan)萃(cui)取(qu)後(hou)進(jin)行GC/MS測定(ding)。研究(jiu)結(jie)果表明:稭稈稀酸水解(jie)液中有(you)五(wu)種(zhong)單(dan)糖(tang),主(zhu)要是(shi)木糖(tang)和葡(pu)萄糖(tang),其次是(shi)阿拉伯糖(tang)、半乳糖(tang)和少量(liang)的(de)甘露(lu)糖(tang);利用(yong)此方法(fa)測定(ding)了壹批(pi)稭稈稀酸水解(jie)液,得到(dao)了該(gai)稭稈稀酸水解(jie)過程的佳(jia)的(de)反(fan)應時(shi)間(jian)。該(gai)方(fang)法(fa)可快(kuai)速(su)、準確(que)測定(ding)稭稈稀酸水解(jie)液中單(dan)糖(tang)的濃度(du),為(wei)水(shui)解(jie)工藝的(de)研究(jiu)提供(gong)了壹種(zhong)有效(xiao)的(de)分析方(fang)法(fa)。
4多(duo)糖(tang)結構(gou)分析
在(zai)生(sheng)物質(zhi)精煉過程中伴隨著多(duo)聚(ju)糖(tang)的化學(xue)變化,研究(jiu)多(duo)糖(tang)結構(gou)變化對(dui)於(yu)糖(tang)平(ping)臺(tai)化合物的(de)理(li)論研究(jiu)和產品開(kai)發(fa)具(ju)有重(zhong)要意(yi)義(yi)。據(ju)文(wen)獻(xian)調研表明,目(mu)前該(gai)方(fang)法(fa)研究(jiu)還(hai)處在(zai)起步階(jie)段,需要借(jie)鑒(jian)其他領(ling)域(yu)的(de)現(xian)代分析方(fang)法(fa),並且(qie)應(ying)用(yong)到(dao)相關(guan)的基(ji)礎研究(jiu)工作(zuo)中去(qu),從而積累更(geng)多(duo)分析經(jing)驗(yan)和方法(fa)創新。近(jin)年(nian)來多(duo)糖(tang)的結(jie)構分析的(de)儀(yi)器設(she)備(bei)、分析方(fang)法(fa)都有(you)了很(hen)大(da)的提高。目(mu)前已(yi)有應(ying)用的方(fang)法(fa)包(bao)括紫(zi)外(wai)光(guang)譜(pu)法(fa)、紅外(wai)光(guang)譜(pu)法(fa)和核磁(ci)共振(zhen)分析法(fa)等(deng)。例如(ru)應用1HNMR可以鑒(jian)別多(duo)糖(tang)中糖(tang)苷(gan)鍵(jian)位(wei)置(zhi),並進(jin)壹(yi)步(bu)確(que)認多(duo)糖(tang)結構(gou)。AshutoshMittal等(deng)[18]通(tong)過(guo)核(he)磁(ci)共振(zhen)氫(qing)譜(pu)的測定(ding)方(fang)法(fa)分析在(zai)不(bu)同溫度(du)和時間下闊(kuo)葉(ye)木(mu)自催(cui)化水(shui)解(jie)半纖維(wei)素(su)溶(rong)出物,從而評(ping)估該(gai)過(guo)程的反(fan)應機理(li)。對(dui)殘(can)留(liu)的聚(ju)木糖(tang)、低聚(ju)木糖(tang)、木糖(tang)、葡(pu)萄糖(tang)及(ji)糖(tang)類(lei)次級(ji)衍(yan)生(sheng)產品,例如(ru)糠(kang)醛(quan)、羧(suo)甲基(ji)糠(kang)醛(quan),進行(xing)了測定(ding)分析。單(dan)糖(tang)和低聚(ju)物則(ze)采(cai)用新的(de)高分辨率(lv)核(he)磁(ci)共振(zhen)氫(qing)譜(pu)光(guang)譜(pu)分析法(fa)。該(gai)方(fang)法(fa)能(neng)定量(liang)分析水(shui)解(jie)抽(chou)提後(hou)的(de)木料上殘(can)余的聚(ju)木糖(tang)和纖維(wei)素(su)殘(can)留(liu)以及(ji)水(shui)解(jie)產物中(zhong)的(de)木糖(tang)和葡(pu)萄糖(tang)。研究(jiu)表明,該(gai)方(fang)法(fa)具有(you)良(liang)好的(de)再現(xian)性並為(wei)分析碳水(shui)化合物的(de)組(zu)成結(jie)構提供(gong)了與以(yi)往報(bao)道方法(fa)結果(guo)可比擬(ni)的新方(fang)法(fa)。Xue-MingZhang等(deng)[19]采(cai)用傅(fu)裏(li)葉(ye)紅外(wai)變(bian)換、1H,13C以及(ji)2D-HSQCNMR核(he)磁(ci)共振(zhen)的(de)分析方(fang)法(fa),對(dui)有機溶(rong)劑提取(qu)的某白楊(yang)木(mu)品種(zhong)半纖維(wei)素(su)糖(tang)液進行(xing)全(quan)面定(ding)性和定量(liang)分析,研究(jiu)了木糖(tang)、葡(pu)萄糖(tang)、甘露(lu)糖(tang)、鼠李(li)糖(tang)、半乳糖(tang)、阿拉伯糖(tang)及(ji)各(ge)種(zhong)糖(tang)醛(quan)酸的(de)組成,並通(tong)過(guo)核(he)磁(ci)共振(zhen)的(de)方(fang)法(fa)研究(jiu)了特(te)定品種(zhong)半纖維(wei)素(su)的結構特(te)點,包(bao)括乙(yi)酰(xian)化半纖維(wei)素(su)與葡(pu)萄糖(tang)醛(quan)酸、葡(pu)萄糖(tang)甘露(lu)聚(ju)糖(tang)的鍵(jian)合方式(shi)等(deng),為(wei)進(jin)壹(yi)步(bu)發酵(jiao)特(te)定產品的(de)機理(li)研究(jiu)提供(gong)了重(zhong)要參考(kao)。
5技術(shu)對(dui)比與展望
與(yu)傳統(tong)糖(tang)類(lei)分析方(fang)法(fa)相比較(jiao),氣相色(se)譜(pu)(GC)、高效(xiao)液相色(se)譜(pu)(HPLC)、毛細管(guan)電泳(yong)(CE)、高效(xiao)陰(yin)離子交(jiao)換(huan)-脈沖安(an)培(pei)檢測法(fa)(HPAE-PAD)、離子色譜(pu)法(fa)(IC)、高效(xiao)薄層(ceng)色(se)譜(pu)(HPTLC)等(deng)高效(xiao)分離分析技(ji)術(shu)在很(hen)大(da)程度(du)上(shang)促進(jin)了糖(tang)類(lei)平(ping)臺(tai)化合物的(de)理(li)論研究(jiu)。各(ge)種(zhong)方法(fa)在糖(tang)類(lei)物質(zhi)分析方(fang)面都(dou)有應(ying)用,但(dan)也存(cun)在著各(ge)自的利弊(bi)特(te)點。在未形(xing)成規範(fan)檢測體(ti)系前,復雜(za)體(ti)系的糖(tang)類(lei)分離檢測要根(gen)據(ju)糖(tang)類(lei)物質(zhi)的具(ju)體性(xing)質(zhi)而定,並在(zai)實(shi)際(ji)檢測分析的(de)工作(zuo)中進(jin)行篩選和總(zong)結(jie)。采(cai)用氣(qi)相色(se)譜(pu)測定(ding)糖(tang)類(lei),問(wen)題(ti)在於(yu)分析前(qian)預(yu)先(xian)轉(zhuan)化成(cheng)易揮(hui)發、對(dui)熱(re)較(jiao)穩(wen)定的(de)衍生(sheng)物。在(zai)某些(xie)衍生(sheng)物的(de)制(zhi)備過(guo)程中,由於(yu)糖(tang)的異(yi)構化會產生(sheng)衍生(sheng)物的(de)異(yi)構體(ti),進而影響組(zu)分的分離和定量(liang)。高效(xiao)液相色(se)譜(pu)分離速度(du)快(kuai)、分離效果好、分辨率(lv)高、重(zhong)現(xian)性好(hao)且不(bu)破壞樣品,但(dan)糖(tang)類(lei)本身(shen)沒有紫(zi)外(wai)吸(xi)收,只能(neng)采(cai)用示(shi)差折(zhe)光(guang)檢測器(RI)或(huo)蒸(zheng)發光(guang)散(san)射檢測器(ELSD)檢測。RI分辨率(lv)低而ELSD雖(sui)然(ran)效(xiao)果(guo)好(hao)但(dan)價格昂貴,壹(yi)般(ban)采(cai)用氨(an)基(ji)柱但分離效果欠佳(jia),而的糖(tang)柱又(you)十分昂貴。薄(bo)層(ceng)色(se)譜(pu)法(fa)(TLC)是(shi)壹種常規實(shi)驗(yan)室可快(kuai)速(su)分析單(dan)糖(tang)組成(cheng)的微(wei)量(liang)而快(kuai)速(su)的(de)分析方(fang)法(fa),但對(dui)於(yu)復雜(za)體(ti)系糖(tang)液分析的(de)準確(que)度(du)相對(dui)較(jiao)低、適(shi)應性(xing)不強。離子色譜(pu)法(fa)簡(jian)單(dan)、快(kuai)速(su)、選(xuan)擇性好(hao)、靈敏(min)度(du)高、可同時(shi)測定(ding)多(duo)組分,且不(bu)需(xu)要預(yu)先(xian)衍生(sheng)化就(jiu)能(neng)分析單(dan)糖(tang)、大(da)部分的寡(gua)糖(tang)及(ji)低聚(ju)糖(tang),正在為越來(lai)越(yue)多(duo)的研究(jiu)者所采(cai)用。總(zong)體(ti)分析,高效(xiao)液相色(se)譜(pu)可以通(tong)過(guo)改(gai)變(bian)分離模式(shi)和色譜(pu)柱滿(man)足不同(tong)性(xing)質(zhi)糖(tang)的分離,且有多(duo)種檢測方(fang)法(fa)能(neng)夠與其聯用以滿(man)足定性(xing)和定量(liang)分析的(de)要求(qiu)。隨(sui)著新型(xing)、高選(xuan)擇性的(de)固定相,高靈敏(min)度(du)衍(yan)生(sheng)化試(shi)劑以(yi)及(ji)質(zhi)譜(pu)等(deng)高效(xiao)檢測技(ji)術(shu)的研究(jiu)與(yu)發展(zhan),高效(xiao)液相色(se)譜(pu)及(ji)相關(guan)技術在(zai)生物質(zhi)精煉過程復雜(za)體(ti)系的糖(tang)液分析中(zhong)的(de)地(di)位(wei)必(bi)將愈加(jia)重(zhong)要。離子色譜(pu)中陰(yin)離子交(jiao)換(huan)色譜(pu)法(fa)-脈沖安(an)培(pei)檢測技(ji)術(shu)對(dui)糖(tang)類(lei)化合物的(de)分析檢測正逐步成(cheng)熟(shu)完善(shan)。目(mu)前分析工作(zuo)者正努力(li)把(ba)陰(yin)離子交(jiao)換(huan)色譜(pu)法(fa)-脈沖安(an)培(pei)檢測的(de)金電極(ji)的(de)高靈敏(min)性的(de)檢測優(you)點(dian)與帶有(you)鋇離子的稀堿淋洗液的高效(xiao)分離法(fa)的優(you)點(dian)結(jie)合起來(lai),形成(cheng)壹種(zhong)測定(ding)植物提取(qu)液中溶(rong)解(jie)糖(tang)類(lei)的理(li)想方(fang)法(fa)